期刊简介
是江苏省教育厅主管，南通大学主办，反映全国交通系统(交通、铁道、民航等)医疗、卫生状况的综合性双月刊，大十六开版。除设有基础医学、临床医学外，还辟有航海医学、民航医学、铁道医学、潜水医学、交通卫生防疫、交通职业病、多发病、常见病防治、医院管理等专栏；本刊面向全国开放欢迎投稿!本刊注重实用性、科学性、先进性、内容丰富、新颖。欢迎各医学院校、医院、情报所等单位和个人订阅。
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- 杂志名称：交通医学杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：南通大学
- 国际刊号：1006-2440
- 国内刊号：32-1412/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
Cyclin D3正、反义表达质粒在淋巴瘤细胞系Raji中的转染与鉴定
邵晓轶；程纯；严美娟；王夏强
关键词：cyclin D3, 表达质粒, 转染, 淋巴瘤, 细胞周期
摘要：目的:构建人类cyclinD3正义和反义真核表达质粒,分别转染到淋巴瘤细胞系Raji细胞中,为探讨cyclinD3基因对淋巴瘤细胞生物学行为的影响提供研究基础.方法:以Raji细胞总RNA为模板,通过RT-PCR获取cyclinD3全长cDNA,克隆入pGEM-T载体,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构成含cyclin D3的表达质粒pcDNA3-cyclinD3.再运用DNA重组技术将cyclin D3基因反向克隆到pcDNA3.1中,构建成cyclin D3反义表达质粒pcDNA3-ascyclin D3.用脂质体介导的基因转染方法,将cyclin D3正、反义表达质粒和空质粒分别导入Raji细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞株,用WesternBlot方法鉴定cyclinD3基因的表达.结果:酶切鉴定和测序分析证实,实验成功构建了cyclin D3正、反义表达质粒.与转染cyclin D3正义表达质粒和空质粒的细胞相比,转染cyclin D3反义表达质粒的Raji细胞中cyclin D3表达水平下降.结论:正、反义cyclin D3在淋巴瘤细胞中的转染和表达,为进一步研究cyclin D3在淋巴瘤细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡中的作用奠定了基础.
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