期刊简介
是江苏省教育厅主管，南通大学主办，反映全国交通系统(交通、铁道、民航等)医疗、卫生状况的综合性双月刊，大十六开版。除设有基础医学、临床医学外，还辟有航海医学、民航医学、铁道医学、潜水医学、交通卫生防疫、交通职业病、多发病、常见病防治、医院管理等专栏；本刊面向全国开放欢迎投稿!本刊注重实用性、科学性、先进性、内容丰富、新颖。欢迎各医学院校、医院、情报所等单位和个人订阅。
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首页>交通医学杂志
- 杂志名称：交通医学杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：南通大学
- 国际刊号：1006-2440
- 国内刊号：32-1412/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
骨形态发生蛋白-4基因重组腺病毒载体的构建
张裕东；赵剑；吴红平；李林芳
关键词：骨形态发生蛋白-4, 重组腺病毒, 基因, 构建
摘要：目的:通过Cre/LoxP位点特异性重组系统构建携带人骨形态发生蛋白-4基因的重组腺病毒载体(Ad.BMP4).方法:根据GenBank获得BMP4的基因序列合成引物,经PCR扩增获得长度为1230bp的BMP4基因片断,经酶切、测序鉴定后,与腺病毒穿梭质粒pSuCMV连接,随后与5'缺陷型腺病毒右臂的质粒pBGHloxP△E1E3通过脂质体Lipofectamine2000共转染至293细胞,获得重组腺病毒Ad.BMP4,并予以扩增、纯化、鉴定.结果:经酶切电泳和测序证明获得的BMP4基因片断序列、大小和方向正确,目的基因插入的位置、方向正确,经重组、扩增和纯化后获得病毒滴度为2.9×109pfu/mi的重组腺病毒Ad.BMP4,以PCR扩增和测序的方法证实了所构建病毒含有目的基因的片断,安全性检测证明所构建的腺病毒无野生性腺病毒的存在.结论:通过Cre/LoxP位点特异性重组系统构建了腺病毒Ad.BMP4.采用的腺病毒载体点特异性重组的方法极大地提高了包装成功率,且包装成功的病毒颗粒均为含有目的基因的重组病毒,从而保证了重组过程的快速和高效.
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