期刊简介
是江苏省教育厅主管，南通大学主办，反映全国交通系统(交通、铁道、民航等)医疗、卫生状况的综合性双月刊，大十六开版。除设有基础医学、临床医学外，还辟有航海医学、民航医学、铁道医学、潜水医学、交通卫生防疫、交通职业病、多发病、常见病防治、医院管理等专栏；本刊面向全国开放欢迎投稿!本刊注重实用性、科学性、先进性、内容丰富、新颖。欢迎各医学院校、医院、情报所等单位和个人订阅。
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首页>交通医学杂志
- 杂志名称：交通医学杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：南通大学
- 国际刊号：1006-2440
- 国内刊号：32-1412/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
铁调节蛋白1真核表达质粒的构建及功能初步研究
成春明；王丹；朱俐
关键词：铁调节蛋白1, 真核表达, 质粒构建, 逆转录聚合酶链反应, 原发性肝细胞癌
摘要：目的:构建人来源铁调节蛋白1(IRP1)真核表达质粒,检测该质粒在人肝癌细胞(HepG2)中的表达及其对转铁蛋白受体1(TfR1)和二价金属转运体1(DMT1)表达的影响.方法:从HepG2细胞中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应获得IRP1的cDNA.根据不同的酶切位点分别构建IRP1 4个分段目的基因,依次连接4段基因并将其构建入真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证碱基序列.用FuGENEHD将质粒pcDNA3.1 (+)-IRP1瞬时转染至HepG2.以QRT-PCR方法检测转染pcDNA 3.1(+)-IRP1质粒,观察对IRP1以及其调控基因TfR1和DMT1表达的影响.结果:扩增出IRP1全长cDNA,构建真核表达质粒,4个质粒经相应酶双酶切后,分子量分别为1261bp、502bp、600bp、310bp.经检测质粒转染至HepG2细胞后,IRP1表达显著高于转染空载质粒细胞.结果显示与对照组相比,转染真核pcDNA3.1(+)-IRP1质粒后IRP1表达显著上调约50倍,TfR1表达增加约3倍,DMT1表达增加约1.5倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:成功构建人IRP1基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IRP1,并证明其能在HepG2细胞内高表达,从而影响IRP1调控基因的表达.
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