期刊简介
是江苏省教育厅主管，南通大学主办，反映全国交通系统(交通、铁道、民航等)医疗、卫生状况的综合性双月刊，大十六开版。除设有基础医学、临床医学外，还辟有航海医学、民航医学、铁道医学、潜水医学、交通卫生防疫、交通职业病、多发病、常见病防治、医院管理等专栏；本刊面向全国开放欢迎投稿!本刊注重实用性、科学性、先进性、内容丰富、新颖。欢迎各医学院校、医院、情报所等单位和个人订阅。
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- 杂志名称：交通医学杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：南通大学
- 国际刊号：1006-2440
- 国内刊号：32-1412/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
pErk1/2在干扰素-γ对干扰素调节因子-1沉默后表达Akt的32D细胞生长中的作用
林莺；刘红；林赠华；姜胜华；陆伟；周鹭
关键词：再生障碍性贫血, AKT, 干扰素调节因子-1, 基因沉默, 干扰素-γ, pERK1/2, 实时定量聚合酶链反应, Western blot检测, 流式细胞仪检测, 小鼠
摘要：目的：运用siRNA沉默干扰素调节因子-1（IRF-1）基因，观察干扰素-γ（IFN-γ）对IRF-1沉默后表达Akt的32D细胞生长增殖的作用，探讨IFN-γ由抑制造血逆转为促进造血的机制。方法：培养表达野生型Akt与无活性型Akt的32D细胞并分别转染，针对IRF-1-siRNA质粒以沉默IRF-1基因，用实时定量聚合酶链反应检测沉默效果，Western-blotting检测IRF-1蛋白表达以验证沉默效果。将处于对数生长期的两株细胞分成3大组：siRNA干扰组、空质粒阴性对照组及空白对照组，前两组分别加入不同浓度的IFN-γ共孵育，用MTS法检测两株细胞增殖情况。用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率；用Western-blotting检测p-Erk1/2表达。结果：（1）加IFN-γ24h后，IRF-1沉默组在IFN-γ低浓度时促进增殖，抑制凋亡。高浓度的IFN-γ仍抑制增殖，促进凋亡。在48h以后IRF-1沉默组各浓度的IFN-γ都促进增殖，抑制凋亡（P＜0.05）。（2）表达野生型Akt的32D细胞在各时间点的增殖比例都大于表达无活性型Akt的细胞。且凋亡率都小于表达无活性型Akt的各组细胞，两者在48h比较差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）表达无活性型Akt的32D细胞，加入IFN-γ后各组均上调了pErk1/2的表达（P＜0.05）。但IRF-1沉默前后，各组pErk1/2表达量比较差异无统计学意义（P>0.05）。表达野生型Akt的32D细胞，在IRF-1沉默后各浓度IFN-γ均下调pErk1/2的表达（P＜0.05）。结论：（1）IRF-1在IFN-γ的促凋亡作用中起重要作用。（2）有活性Akt的表达可抑制Erk信号通路，其活性状态决定了IRF-1封闭后IFN-γ对pErk1/2表达的作用，pErk1/2的表达影响细胞增殖与凋亡，但并不决定IFN-γ作用的逆转。（3）Akt信号通路在IFN-γ逆转机制中起作用。
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